在藥品研發中，質量研究是重點。參考指導原則，現將質量研究分成四個部分：質量研究項目的選擇及方法初步確定；質量標準的方法學驗證；質量對比研究；質量標準的制定。

質量研究項目的選擇及方法初步確定

質量研究項目的選擇及方法初步確定：可稱為質量標準草案的初步建立（此項工作應在輔料相容性試驗之前完成）。

1、遵循“就高不就低”的原則。結合所查詢的產品質量標準（原研標準、國內首仿標準、藥典標準）和藥典對具體劑型的要求，確定出質量標準草案。靜脈注射劑處方中加有抗氧劑、抑菌劑、穩定劑和增（助）溶劑等，眼用制劑處方中加有防腐劑等，應對相應的輔料進行定量研究。

對于國家藥品標準中收載的項目，首先應考慮選用標準中收載的檢測方法。

2、若有關物質檢測方法多種并存時，建議初步對比研究來確定方法。如有雜質對照品，用雜質對照品來確認方法的可行性；如沒有雜質對照品，可做一強制降解試驗（需要特別注意的是降解程度為10%左右，在此情況下判定物料平衡才有意義），來初步判定檢測方法的可行性。

判定標準：有雜質對照品時，系統適用性、分離度、有效檢出、精密度及重現性。

無雜質對照品時，系統適用性、降解雜質的有效檢出、物料平衡。

3、質量標準草案的初步建立。

質量標準的方法學驗證：

具體分為兩個方面：方法的初步驗證和系統的方法學驗證。

1、質量標準的初步驗證（在中試之前完成）：

①在配合處方工藝篩選檢驗時，就是質量標準初步驗證的過程。例如輔料相容性試驗、參比制劑與小試產品的對比檢驗、小試產品的影響因素試驗等，就可以對方法的可行性進行一個初步的判斷。

在這時，方法學研究偏重于驗證國家標準中的檢測方法和條件是否適用，重點考察方法的專屬性和準確度。如方法學研究結果顯示方法不適用，應首先分析原因，通過調整處方工藝等以使方法適用；

在原因無法確認的一些極端條件下，才考慮建立新的檢測方法，但新方法首先要按照化學藥物質量控制研究相關指導原則進行研究，還需通過比較研究證實與原方法具有同等的控制程度。

因此，原則上不要更換已有的國家藥品標準的色譜條件。當分離度達不到時，可適當調整流動相的比例。

討論：在前期的處方篩選中，質量標準并沒有真正建立，最終確定的質量標準可能不一樣。這種情況下，認為處方篩選的數據仍然可以放入申報資料中，這和處方篩選的目的并不背離，同時也反映出質量研究的開展過程。

②出具三批小試樣品的檢驗報告書。

2、系統的方法學驗證：

在初步驗證的基礎上，需對質量標準進行系統的方法學驗證。方法學驗證所用樣品應采用中試產品。

驗證項目（品種及劑型不同檢測項目不同）：

① 性狀；鑒別(理化鑒別和光譜鑒別)；

② 一般檢查項（按中國藥典制劑通則）；

③ 微生度檢測（需進行完整的方法學驗證試驗）；

④ 溶出度，有些可以和含量一起驗證；

⑤有關物質（需進行完整的方法學驗證試驗）；

含量測定（需進行完整的方法學驗證試驗）、衛生學方法學驗證。

其中重點是有關物質和含量的方法學驗證。

3、有關物質驗證的內容有：

（1）系統適用性：

取樣品，按照有關物質供試品濃度配制溶液，進樣，記錄圖譜。理論板數應符合規定，分離度應大于2.0或符合規定、拖尾因子應0.8-1.2或符合規定。

有已知雜質并且雜質對照品可獲得的：配制6份相同濃度的雜質溶液進行分析，該雜質峰峰面積的相對標準差應不大于 2.0%，保留時間的相對標準差應不大于 1.0%。另外，理論板數應符合規定，分離度應大于 2.0或符合規定、拖尾因子應0.8-1.2或符合規定。

（2）專屬性：

空白溶劑干擾試驗、空白輔料試驗、強制降解試驗（高溫、強光、強氧化、強酸、強堿等）、已知雜質定位試驗、峰純度檢查（二極管陣列檢測、質譜檢測）。

（3）檢測限與定量限：

一般采用信噪比法。有已知雜質并且雜質對照品可得的，須用已知雜質對照品同時做。信噪比10：1，為定量限；信噪比為3：1，為檢測限。

（4）線性關系試驗：

至少要做五個濃度，如 60%、80%、100%、120%、140%（相對于自身對照濃度）的系列溶液。取該系列溶液進樣，記錄色譜圖，計算回歸方程。

若有已知雜質并且雜質對照品可得的，則取已知雜質對照品另作線性關系試

驗，供試品中已知雜質峰面積，應在線性范圍內。

（5）精密度：

只做重復性和中間精密度即可。

（6）溶液穩定性：

（6）準確度：

一般以回收率試驗進行驗證。無已知雜質的，可不做。有已知雜質的，須做加樣回收試驗驗證準確度。

討論：有關物質的檢測中，要檢測的是雜質，而不是原料。因此，認為在有已知雜質對照品，并且在標準中對此雜質進行了單獨控制的時候，方法學驗證的內容應圍繞著已知雜質展開，不可以用原料來代替。當無已知雜質對照品時，才用原料代替。

在做強制降解試驗時，建議同時用空白輔料平行做強制降解試驗，特別是含有特殊輔料的，如防腐劑等在紫外有吸收的輔料。關于強制降解試驗，不僅是方法學驗證的內容，而且是對產品的降解途徑、雜質譜及產品穩定性判定的過程。

仿制藥相關指導原則要求仿制品與原研藥應比較雜質譜、雜質量及降解途徑。因此，建議把研試品與原研藥平行進行強制降解試驗（均約10%），這樣可以直觀比較兩者的降解途徑是否一致；降解物是否有差異；檢查方法對兩者的專屬性差別（由于擬定的方法多是原研藥的檢測方法）。平行對比破壞性試驗研究，是評價研制藥和被仿藥質量是否相同的重要手段。

4、關于強制降解試驗中物料平衡的問題：

①首先，降解強度為10%左右，不超過10%。

②有雜質對照品時，計算出校正因子，將校正因子代入計算。

③做峰純度檢查（二極管陣列檢測），二極管陣列檢測的作用不僅是峰純度檢查，另外，還反映出雜質及主藥的總體紫外吸收情況。可以計算在不同波長處的物料平衡情況（按具體品種而定）。

④計算方法：通過與正常樣的總峰面積對比。具體做法：建議取一定量的樣品溶解，作為母液，分別從母液中取一定量進行個因素的降解試驗，再與此母液做的正常樣進行對比，這樣做出的結果才可靠。

出具三批中試樣品檢驗報告書。

質量對比研究（采用中試產品）：

質量對比研究是判斷仿制藥與被仿制藥質量 “一致性”或“等同性”的重要方法，可以全面了解產品的質量特征，為仿制藥注冊標準的建立提供依據。

1、溶出曲線對比研究：

一般采用在四種溶出介質（PH1.2、PH4.5、PH6.8.水）中的溶出曲線對比的方法，用f2因子法（f2>50）來比較原研藥和仿制品的曲線相似性。

注意事項：

①用于比較的兩種制劑含量差值應在 5%以內。

②計算時所選取的時間點間隔無需相等，但兩制劑所取時間點必須一致；且計算時間點應不少于 3個；由于該計算結果有依賴于比較時間點個數的特性，故在溶出率 85%（緩釋80%以上）以上的時間點應不多于一個。溶出量應按累計溶出量來計算。

③除 0時外，第一選取時間點溶出結果的變異系數應不得過 20%，自第二時間點至最后時間點溶出結果的變異系數應不得過 10%。如超出，應從儀器適用性或樣品均一性的角度考慮予以解決。

2、雜質的對比研究（此項內容可與方法學驗證同做）：

對于有關物質檢查，由于原料藥制備工藝、制劑處方工藝的不同，仿制藥的雜質種類和被仿制藥可能不同，因此要求進行對比研究，分析仿制藥和被仿制藥中雜質的種類和含量情況。

①可通過強制降解試驗及影響因素試驗的對比研究，來比較仿制藥與原研藥的雜質種類、降解途徑及雜質大小。

②對于復方制劑來講，首先應對雜質進行歸屬。采用方法：分別做單個原料、空白輔料及制劑的強制降解試驗。

要求如下：

如果研制產品中雜質的含量超出了國家標準規定，或者研制產品中含有已上市產品中未含有的新雜質，則建議首先通過改進處方工藝降低雜質含量或種類，使不高于被仿制藥。

否則需要分析雜質的安全性并提供有關數據，必要時應進行相關的安全性試驗。如果國家標準中未規定雜質檢查或限度，研制產品的雜質含量不能明顯高于已上市的同品種的雜質實測值，雜質種類也不得更多，否則也需要分析雜質的安全性并提供有關數據，必要時應進行相關的安全性試驗。

3、檢測方法的對比研究（與方法學驗證同時進行）：

如研究發現國家藥品標準中一些檢測方法不適用于研制產品，為進一步驗證是檢測方法存在問題，還是研制產品自身存在質量問題，可以采用被仿制藥進行對比研究。

質量標準的制定（結合對比研究結果、穩定性研究結果制定）：

1）可在國家藥品標準的基礎上，參考國外藥典及參考文獻，增加必要的檢測項目。

2）檢測方法：如新建方法與國家藥品標準中收載方法相比無明顯優點時，因國家藥品標準已經過較長時間和多家單位的驗證，建議仍采用國家藥品標準中收載方法。

3）限度：有多種方法可參考時，限度的制定遵循“就高不就低”的原則。

4）分別制定貨架期標準及放行標準，即注冊標準和內控標準，寫入申報資料。