關(guān)于禽抗非洲豬瘟抗體田間試驗的總結(jié)

2019-6-24

近兩個月來，利用禽抗非洲豬瘟抗體進行了大量的田間試驗，總計使用100公斤左右的抗體粉和2000公斤的液體抗體，共有200多豬場計8萬頭豬（包括公豬、母豬、保育豬、育肥豬等）使用，其中公豬約3000頭，母豬約2.7萬頭，商品豬5萬頭，涉及粵、桂、閩、冀、豫、魯、津、滬、遼、川等10個省、市區(qū)，取得了一定的成果。總的來說對未發(fā)病潛伏期和剛發(fā)病豬群效果好（病毒血液載量小于1000納克/微升，一般在300納克/微升左右），約占6萬頭左右，表現(xiàn)一是使用抗體后，發(fā)病數(shù)下降，二是維持不發(fā)病時間長。對已發(fā)病、暴發(fā)期或發(fā)病末期的2萬頭豬效果一般或不好。

下面介紹一些典型的事例，供參考，由于大多豬場不希望公布自己的具體名稱和詳細地址，我們尊重行規(guī)僅就大體情況進行說明。

        一、對于非洲豬瘟發(fā)病豬的治療情況

盡管禽抗非洲豬瘟抗體從制備一開始就沒有做治療的打算，但依據(jù)實驗要求，還是做了一些注射級抗體，小范圍試驗表明，抗體能夠延緩疾病發(fā)展、遲滯病毒的復(fù)制速度，但不能阻擋疾病的整體發(fā)展。輕癥有一定效果，正在發(fā)展的只是延緩疾病發(fā)展，特別是非洲豬瘟轉(zhuǎn)歸期，則不能直接阻止細胞因子風(fēng)暴引起的豬只死亡。

如今大規(guī)模的田間試驗也能證明這個小群體試驗結(jié)果。

實例一：廣西西部某養(yǎng)豬戶有十幾頭當(dāng)?shù)睾谪i品種，豬身發(fā)紅、公豬睪丸發(fā)紫，不忍看著豬死，盡管獸醫(yī)人員建議他別治了，但該畜主堅持愿意打打液體抗體，承諾自己負(fù)全責(zé)，實驗結(jié)果，只是豬比不打針的晚死個三四天，還是治不過來。

實例二、河北舊督府某種豬場，每300頭母豬一周發(fā)病75頭，死亡15頭，實際上該場已經(jīng)處于疾病的爆發(fā)期， 但第一周內(nèi)使用預(yù)防藥量用藥1克200公斤體重拌料三天，發(fā)病豬注射預(yù)防量液體10毫升，發(fā)現(xiàn)第二周仍出74頭病豬，死亡13頭，前后差別不大，實際上只是遲緩了疾病的進一步發(fā)展和擴大，不用藥的豬群發(fā)病比用藥的快，不用藥“對照組”300頭母豬發(fā)病的能增加到100多頭。同時該場使用預(yù)防用藥量1克200公斤體重防該場500頭保育小豬，小豬倒是一直沒有發(fā)病。第二周，該場加大注射用量到30毫升每頭發(fā)病豬，連用三天，豬只癥狀不加重也不減輕可達3天，停藥一兩天后，癥狀又開始加重。第二周，同場預(yù)防藥量的保育豬仍沒有發(fā)病。

注意：本文圖片僅為加強理解，這些真正照片并不針對指向某一養(yǎng)殖場。

本圖中，皮膚三角所示的皮膚嚴(yán)重出血，一是顯示遠端血液循環(huán)系統(tǒng)的崩潰，二是平行發(fā)生的相應(yīng)的內(nèi)臟器官的衰竭。此種狀態(tài)下的病豬的治療已經(jīng)沒有太大的意義了，通俗地說“閻王爺已經(jīng)劃了勾了”。盡管仍有很多豬場“強烈”希望能“治”過來。

       二、對未發(fā)病或潛伏期豬場的使用情況

相對來說，未發(fā)病和潛伏期沒有前驅(qū)癥狀的豬場使用量很少，大多是發(fā)病豬場對“未發(fā)病”豬群的保護，要注意，豬場的“未發(fā)病”概念和獸醫(yī)科研單位的理解是不一樣的。科研單位一般在豬場中檢測到病毒，盡管豬場可能沒有發(fā)病豬，就直接說這個場子被感染了，而豬場一般認(rèn)為有癥狀：發(fā)燒不吃或皮紅了，才是有病了。

實例一：天津某豬場，130多斤育肥豬200多頭，第一周出現(xiàn)發(fā)燒豬食欲下降豬8頭，PCR確診后立即使用抗體粉拌料，第二周三天使用預(yù)防量，出發(fā)燒豬2頭，第三周持續(xù)使用，藥量加大三分之一，一頭沒有出現(xiàn)。現(xiàn)在該場豬群4000多頭包括保育豬已全部使用抗體粉預(yù)防。

實例二、廣西東部某豬場，有母豬有商品豬，母豬一半多已發(fā)病，并出現(xiàn)死亡，保育豬和育肥豬沒有發(fā)病，二者同時使用抗體粉200公斤體重一克，一周用三天拌料，母豬另外使用液體抗體注射，試驗中13頭發(fā)病母豬，每頭注射20毫升液體抗體，連用三天，有4頭母豬開始吃料，其中有兩頭流產(chǎn)后仍吃食，與不打針不用藥的流產(chǎn)母豬流產(chǎn)后仍發(fā)燒不吃不同，但停藥一兩天后，癥狀復(fù)發(fā)。該場兩個試驗場1000多頭保育豬和育肥豬用藥后沒有發(fā)病，該場場長總結(jié)說，盡管非洲豬瘟卵黃抗體對發(fā)病豬治療效果不好，但對未發(fā)病的豬群保護作用還是有的，他這幾個月來用藥無數(shù)，但只有抗體是有一定效果的藥物，現(xiàn)在他8個豬場已全部使用了抗體粉。同時建議他發(fā)病豬與未發(fā)病豬盡量分開，當(dāng)然，單憑眼觀是不能將潛伏的感染者挑出來的。

非洲豬瘟是接觸傳播，不隨空氣傳播，但不同場的發(fā)病速度和傳播速度常有很大的差異，這與豬場采取的生物安全措施及管理，還是有很大關(guān)系的。

            三、有關(guān)問題

1、為什么不用禽抗非洲豬瘟抗體治療而只是“預(yù)防”？

答：普通人的印象里，抗體就是治病的，不治病怎么能叫“抗體”呢？實際上，真正情況與印象還是有很大的差別的，非洲豬瘟目前一是不能做到全面撲殺，二是沒有疫苗，如果有疫苗的話，豬群都做過一兩次免疫，有一定的基礎(chǔ)抗體或加強免疫的抗體，當(dāng)有野毒攻擊時，可以考慮使用抗體治療。三是非洲豬瘟非常特殊，病毒復(fù)制主要靠單核細胞和巨噬細胞，能在免疫系統(tǒng)內(nèi)大量復(fù)制而不被免疫系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)，所以一上來短時間內(nèi)病毒就會復(fù)制很多倍，我們檢測，非洲豬瘟病毒在潛伏期能達到300到800納克/微升，一旦眼觀癥狀出現(xiàn)，就達到了3000~30000納克/微升，最高的一例血液病毒載量是116044納克/微升，相當(dāng)于病毒量增加300倍以上，相應(yīng)的藥量不可能達到300倍！那樣藥就比豬貴了，還有一個問題就是非洲豬瘟到了癥狀明顯期，其死因少一半是病毒攻擊，另一半多是病毒侵入組織器官所引起的致死性的細胞因子風(fēng)暴，這時就是你即使大成本中和了病毒，細胞因子風(fēng)暴也需要一段時間甚至幾天下來，這個過程沒有完成，豬就有可能已經(jīng)死了。這個細胞因子風(fēng)暴類似于人的禽流感感染。所以非洲豬瘟還是很可怕的。當(dāng)然抗體可以進一步純化和提煉，但成本相應(yīng)地會更高，更超過承受能力。

所以禽抗非洲豬瘟抗體只用于預(yù)防和潛伏期病毒量少時，而不用于治療。實際上，抗體無論在病毒多還是病毒少時，只是一個中和病毒作用，并不是日常理解上的“預(yù)防”，不是防疫意義上的那個“預(yù)防”。另外，今年下半年明年上半年，隨著非洲豬瘟的不斷進行區(qū)域性擴展和深入，發(fā)病烈度和廣度會有所下降，但豬場原有的藍耳、豬瘟、偽狂犬、圓環(huán)病毒等都會重新出現(xiàn)，混合感染和繼發(fā)感染病例會大大增加，防控局面會更加復(fù)雜化。

2、非洲豬瘟抗血清有效果嗎？

答：當(dāng)然有。這一點美國《豬病學(xué)》第九版第307頁第十版414頁上寫得很清楚：

非洲豬瘟病毒有很好的免疫原性，能夠產(chǎn)生很好的抗體，由于非洲豬瘟復(fù)制的特殊性，大部分直接感染病毒的豬只在沒有產(chǎn)生抗體時就會死亡，但是康復(fù)豬或其它免疫方法產(chǎn)生的非洲豬瘟全病毒抗血清抗體還是能夠降低病豬體內(nèi)病毒載量、遲緩病毒復(fù)制的。國內(nèi)一些單位（不是我們）使用非瘟血清在廣西等地做的實驗，也和美國《豬病學(xué)》上的效果差不多。現(xiàn)在的禽抗非洲豬瘟抗體也能達到和血清相近或更好的效果。

至于一些自媒體群中在本月將血清和卵黃抗體也列入“不管事”藥物里邊，甚至于有的豬場還大罵“血清”理論是騙人的，因為他自己用康復(fù)豬血清豬打病豬，“打一個死一個”，甚至推論“卵黃抗體也是騙人的”。其實上這些老板們不知道的是，美帝或歐洲帝國主義也確實沒有說，一半以上的康復(fù)豬血清里是含有大量病毒的，更沒有說，如何祛除血清中的病毒！所以個別豬場沒有想好這個問題，就盲目做一些嘗試，當(dāng)然是要吃虧的，甚至要吃大虧交高級學(xué)費的。當(dāng)然，如果出現(xiàn)假貨或冒牌騙人的東西，比如什么“今珠多糖”之類的問題，那是社會學(xué)問題，不屬于科研問題。

實際上美帝沒有告訴我們的事情還有很多。比如魯國某豬場將發(fā)病豬內(nèi)臟處理滅活后當(dāng)疫苗給豬打，結(jié)果給發(fā)病豬打了60頭死了60頭，不發(fā)病豬打了58頭死了58頭？原因在哪里呢？答案也在美帝《豬病學(xué)》的這張圖里，原因它可沒說！看看能讀到此文的讀者能看出來嗎？

3、禽抗非洲豬瘟抗體可以測量嗎？如果測量？

答：當(dāng)然可以，每克抗體粉含量大于100納克。可以通過新建間接ELISA體系測量，可以用非洲豬瘟重組蛋白或全病毒包被去測量卵黃抗體，注意二抗要使用兔抗雞或鼠抗雞二抗并用辣根過氧化物做標(biāo)記就行，注意不要使用羊抗豬或鼠抗豬二抗的ELISA，這個常測不到或者測到的值很低。相應(yīng)的膠體金試紙卡使用也要注意這個問題。

注意藍色越深，則抗體與病毒結(jié)合的越多，抗體量就越高。這也從另一個側(cè)面反映了禽抗非洲豬瘟抗體是可以中和非洲豬瘟病毒的，即它是能對抗非洲豬瘟的，當(dāng)然下面還要談到正規(guī)的抗體保護細胞免受病毒攻擊的正規(guī)試驗。

您也可以建立其它方法檢測，我們會在申請后，放棄所有權(quán)利訴求，及時公布所有技術(shù)細節(jié)，以供相關(guān)科研人員參考和檢測。熱烈歡迎并強烈支持有意鑒定、檢測和測量抗體的同行做這一工作，我們會提供技術(shù)方面的大力支持。

4、抗體如何做“攻毒”試驗驗證？

有能力做的驗證，也可以做細胞攻毒實驗，設(shè)上對照接毒組，另外的就是不同濃度的病毒和抗體結(jié)合一個小時后，再接細胞，看抗體對細胞的保護率或者說病毒對細胞的攻擊率，如下圖：

  總之，禽抗非洲豬瘟“預(yù)防”和潛伏期抑制病毒效果顯著，但是距離養(yǎng)豬場想快速治療發(fā)病豬，還有很大的距離。在沒有非洲豬瘟疫苗免疫前提下，禽抗非洲豬瘟抗體還是治不了發(fā)病豬的。

致謝多位一線默默工作的優(yōu)秀獸醫(yī)，為禽抗非洲豬瘟科研品驗證和使用，為闖出一條把豬養(yǎng)成的新路，所做出的辛勤努力！