近期,中國科學院合肥物質科學研究院技術生物與農業工程研究所研究員黃青課題組在基于生物光譜快速篩選高產蝦青素突變株方面取得進展,相關研究成果發表在國際光譜學專業期刊Applied Spectroscopy 和應用微生物學期刊Letters in Applied Microbiology 上。
蝦青素是一種類胡蘿卜素,具有極強的抗氧化能力,被廣泛應用于化妝品、食品、畜牧和水產養殖中的飼料等領域。雨生紅球藻是天然蝦青素生產的主要來源,但是自然界中的雨生紅球藻藻種具有蝦青素產量低、生長速率慢的缺點,這就需要發展高效的雨生紅球藻的品種選育技術,其中包括誘變和篩選技術。黃青研究組對此開展了研究。
他們首先在利用低溫等離子體獲得多種雨生紅球藻突變株方面取得進展。但是,如何從這些誘變株中快速篩選具有高產蝦青素性能的突變株,是需要解決的關鍵問題,對發展高效的誘變育種技術至關重要,為此,黃青提出基于生物光譜的誘變藻株篩選方法。生物光譜是利用生物分子或者基團的發射、吸收或者散射光譜的特征來確定其組分、性質、結構及含量,它具有簡單、快速、實時動態和無損檢測等優勢,結合顯微成像能夠實現對生物體進行多組分、微觀空間的觀測。課題組從分析雨生紅球藻細胞的化學成分及隨時間變化過程入手,研究其生長代謝關系,在其早期生長階段鑒別出高產蝦青素的誘變株,并建立起有效的光譜篩選的方法。
研究顯示,利用紅外和拉曼顯微光譜及成像技術可以很好地對蝦青素、β胡蘿卜素、蛋白質、脂類和多糖的含量和空間分布進行快速定量分析。這樣,可以在細胞水平上分析產蝦青素的過程,從而建立在生長早期對高產蝦青素突變藻株快速鑒別的方法。在應用紅外光譜中,他們發現用光譜吸收強度I(1740)/I(1156)可以預測蝦青素產量,以此可以作為測度不同藻株中蝦青素含量的一個重要光譜篩選指標。另一方面,利用拉曼光譜顯微成像并結合多元曲線分辨(MCR)分析方法,能夠在單細胞水平上對蝦青素、β胡蘿卜素和葉綠素的含量實現定量分析。此外,還應用紅外和拉曼光譜結合主成分分析(PCA)能夠實現不同蝦青素產量的雨生紅球藻突變株快速區分。這些研究結果發表于國際光譜學專業期刊Applied Spectroscopy。
此外,黃青研究組還探索了對藻株群體細胞的近紅外光譜(NIRS:near-infrared spectroscopy)篩選方法。他們把群體藻株的近紅外光譜并結合生化檢測建立了基于偏最小二乘(PLS)的生物量、蝦青素含量及蝦青素在藻細胞的干重的百分含量的預測模型,由此可以對蝦青素不同產量的雨生紅球藻突變株進行預測,獲得較高的預測準確率。這項工作發表于Letters in Applied Microbiology。
以上研究工作得到國家自然科學基金項目的資助和支持。
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