隨著重組蛋白表達技術的不斷成熟,在蛋白序列上插入以His-tagged(組氨酸)、GST-tagged(谷胱甘肽轉移酶)等為代表的標簽分子作為通用方法,其制備的融合蛋白在表達、檢測、示蹤和純化等方面表現出巨大的便利性,廣泛應用于蛋白質基礎研究和大規模生產階段等方面。金屬螯合層析是純化His-tagged融合蛋白的首選方法,具有特異性強、洗脫條件溫和等特點,已成為重組蛋白純化領域的通用方法之一。面對生物上游技術突飛猛進的發展,如何提升重組蛋白純化處理能力,是層析領域亟待解決的問題。
日前,中國科學院過程工程研究所國家生化工程技術研究中心(北京)開發出新型高載量金屬螯合介質,通過向金屬螯合介質內部引入線性大分子,并對其進入程度進行有效調控,從而極大地提高了介質結合蛋白能力,對His-tagged標簽蛋白的最大吸附載量比市售進口介質提高兩倍以上。與此同時,介質的穩定性能和流通性能也大大改善,流速較市售進口介質增加約30%,耐壓性顯著提升。這種新型高載量金屬螯合介質在大規模重組蛋白純化領域極具應用優勢。相關研究內容作為封面文章發表在Journal of Separation Science上 [Lan Zhao, Jingfei Zhang, Yongdong Huang et al. Efficient fabrication of high-capacity immobilized metal ion affinity chromatographic media: The role of the dextran-grafting process and its manipulation, Journal of Separation Science, 2016, 39, 1130-1136]。
該研究得到了國家科技支撐計劃(No. 2013BAB01B03)和“863”計劃(No. 2014AA021006)等項目支持。
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