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高效液相色譜儀基于經(jīng)典氣相色譜的理論和方法

作者: 2015年04月03日 來源:互聯(lián)網(wǎng) 瀏覽量:
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高效液相色譜儀的發(fā)展是由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典高效液相色譜儀。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(H

  高效液相色譜儀的發(fā)展是由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典高效液相色譜儀。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜儀的時代。高效液相色譜儀使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),以高壓驅(qū)動流動相,使得經(jīng)典高效液相色譜儀需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成

  高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 高效液相色譜儀由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

  高效液相色譜儀是目前應(yīng)用最多的色譜分析方法,高效液相色譜儀系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。

  使用高效液相色譜儀時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,高效液相色譜儀通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,高效液相色譜儀的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,高效液相色譜儀適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。

  高效液相色譜儀梯度系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于中藥飲片廠原料分析,化工原料分析,飼料企業(yè)、農(nóng)藥企業(yè),大型生產(chǎn)企業(yè)中的生產(chǎn)過程控制等領(lǐng)域。儀梯度系統(tǒng)最好的選擇!

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