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翻袋式離心機在VB2細胞收集上的應用研究

作者: 2013年07月22日 來源: 瀏覽量:
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[摘要】研究了翻袋式離心機在VB細胞收集上的應用,比較了同批次的VB發酵液應用板框過濾機與翻袋式離心機過濾收集菌絲細胞過程中的濾速、濾餅含水量和濾液透光率等指標,目的在于考察摸索發酵液中細胞收集的新技術手
[摘要】研究了翻袋式離心機在VB 細胞收集上的應用,比較了同批次的VB 發酵液應用板框過濾機與翻袋式離心機過濾收集菌絲細胞過程中的濾速、濾餅含水量和濾液透光率等指標,目的在于考察摸索發酵液中細胞收集的新技術手段,以提高生產效率、收率和濾液質量。試驗結果表明,用翻袋式離心機處理VB。拔酵液可以提高過濾速度和濾液透光濾,同時降低濾餅含水量。 
  [關鍵詞】翻袋式離心機;VB 拔酵液;細胞收集
  [中圖分類號】TQ 051.8+4;R 977.2\'2 [文獻標識碼】B [文章Jgl~"]1003-5095(2004)04-0045-02
  丙酸菌厭氧法是目前國內生產VB。:的主要方法之一,生產過程中從發酵液中收集細胞采用板框過濾。由于發酵液粘稠且成分復雜,存在濾速慢、收率低、雜質包埋、批次間差異大等問題,是制約VB :生產水平提高的主要因素。德國海因克爾公司生產的翻袋式離心機具有分離因數高、運行平穩可靠的優點,主要用于終端產品的過濾分離。但用于細胞分離方面未見報道,本實驗對這種離心機用于VB :細胞收集進行了研究。
  1 材料與試驗方法
  1.1 材料
  VB :發酵液(由河北中潤制藥有限公司提供);去離子水;其他試劑為分析純。濾布。
  1.2 儀器設備
  翻袋式離心機(直徑300 mln,德國海因克爾公司);高效液相色譜儀(安捷倫一1100)、紅外水分天平(德國沙多利斯);電子天平(梅特勒一AX 205);秒表;量筒等。
    1.3 實驗方法及操作
    1.3.1 方法
    將VB :發酵液計量體積,用翻袋式離心機過濾收集細胞,將細胞破壁檢測VB :含量以計算過濾收率。
    1.3.2 操作步驟
    檢查離心機確認完好后裝好濾布。取處理好的發酵液精確計量體積并測定VB :含量。開啟翻袋式離心機。在轉速2 500—3 000 r/rain下緩慢加入VB 拔酵液,收集濾液填入離心機至濾液完全澄清透明。連續加入發酵液,離心至無濾液流出。降低轉速,緩慢加水浸洗濾餅,提高轉速甩至無濾液流出。
    低速轉動下將離心機的濾袋推出,提高轉速甩出濾餅收集,停機。計量濾餅重量。同時收集濾液,計量濾液體積。分別送樣測VB :含量及濾餅含水量。連續處理5批,與同批次生產中板框過濾進行比較。全過程記錄每步操作時間,試驗結束后計算濾速、收率。
    1.4 檢驗方法
    1.4.1 精密稱取收集的VB :細胞,水解破壁用氰化鈉轉化,以高效液相色譜儀進行檢測。色譜柱:C 。5 m,250 rain,流動相:乙腈2%磷酸二氫鈉緩沖液=20:80,保留時間6.4 min。
    1.4.2 精密稱取收集的VB :細胞,用紅外水分天平稱重后紅外加熱至恒重,記錄加熱前后重量。
    1.5 計算方法
    收率=(濾餅中VB :含量×濾餅重量)/(發酵液中VB :含量x發酵液體積)
濾餅含水量=(加熱恒重前濾餅重量一加熱恒重后濾餅重量)/加熱恒重前濾餅重量
    2 結果
    2.1 收率
    用翻袋式離心機處理濾液與生產中板框過濾的同批次發酵液比較收率結果,如表1所示。
                 
    2.2 濾速
   用翻袋式離心機處理濾液與生產中板框過濾的同批次發酵液比較收率結果,如表2所示。
                
    2.3 含水量
    用翻袋式離心機處理濾液與生產中板框過濾的同批次發酵液比較收率結果,如表3所示。
               
    3 結 論
    用翻袋式離心機收集發酵液與生產上采用的板框過濾相比,不僅可以簡化操作、降低勞動量、改善操作條件,而且濾速和收率都略有提高;殘液量大大降低,有利于下一步操作;批次間差異很小,解決了濾速波動造成的收率降低和進度滯后,使規范化生產成為可能。因此,翻袋式離心機在VB。:細胞收集上優于板框過濾,可用于工業生產。開辟了細胞收集方式工業化的新思路。
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